动物细胞培养基中添加饲养细胞的的作用?
添加饲养细胞的作用是促进细胞的发育。动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。
动物细胞培养原理
动物细胞培养的原理是细胞增殖,动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
一、细胞增殖的意义:
1、细胞增殖是生物繁殖的基础:单细胞生物以细胞分裂的方式产生后代;多细胞生物的繁殖和发育的基础、
2、细胞增殖是高等生物完成正常生命活动的基础:细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
二、细胞通过分裂进行增殖:
细胞增殖是细胞重要的生命活动,是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。
1、单细胞生物:细胞增殖而繁衍。
2、多细胞生物:从受精卵开始,要进行细胞的增殖和分化逐渐发育成个体。
3、真核细胞的分裂方式:有丝分裂、无丝分裂、减数分裂。
动物细胞培养的条件
动物细胞培养的条件如下:1、无菌、无毒的环境对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。2、营养物质无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)。血清和血浆(提供细胞生长必须的营养成份)3、温度和气体环境温度和pH(36.5±0.5℃,7.2至7.4);气体环境(95%的空气+5%CO₂的混合气体)其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定。4、培养液成分体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。动物细胞培养分类:1、原代细胞将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞,一般培养10代后不再增殖,死亡。2、传代细胞传代培养是细胞培养常规保种方法之一,也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长,这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细地无菌操作。培养的细胞为癌变或人为癌化的细胞,理论上可以无限增殖。癌化的方式有很多:进行癌基因突变,感染病毒,从癌症供体体内分离,物理或化学方法(如紫外,化学试剂)等。
动物细胞的培养
.动物细胞培养液的成分:体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。2.动物细胞培养液的特点:液体培养基、通常含动物血清。3.动物细胞培养的条件:①无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。②营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 。③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 。④温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4) 。⑤气体环境(95%的空气+5%CO 2的混合气体) 。其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定 。3.基本过程取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。 培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取。与植物细胞的区别1.培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基) 。2.培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要。3.产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是同一种的细胞。4.原理不同:植物组织培养的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖。5.过程不同:植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。